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细说激光共焦显微镜中荧光显微镜系统原理
  • 发布日期:2020-03-10      浏览次数:171
    •    激光共焦显微镜是一个表面的精密三维测量分析集于一体的。µsurfexplorer适用于计量测试实验室以及在生产环境中使用由于它的坚固性。用共聚焦显微镜µsurfexplorer测量快速、简单的几步的功能。灵活和用户友好的光学测量系统已成功地应用于许多公司和行业的粗糙度测量,根据ISO,测量地形,微观几何形状,层厚度或其他参数。µsurfexplorer是在汽车行业,成功部署的医疗技术、微电子技术、造纸和印刷业、钢铁业、光学生产。
       
        基本原理:
        从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。共焦显微镜在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichroicmirror),将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在其焦点上有一个带有“针孔”(Pinhole)的挡板,小孔就位于焦点处,挡板后面是一个光电倍增管。可以想像,探测光焦点前后的反射光通过这一套共焦系统,必不能聚焦到小孔上,会被挡板挡住。于是光度计测量的就是焦点处的反射光强度。其意义是:通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。这样的构想,是在1953年,美国学者马文·明斯基提出,经过了30年的发展,才利用激光为光源,发展出符合马文·明斯基理想的共聚焦显微镜。
       
        激光共焦显微镜荧光显微镜系统:
        显微镜是LSCM的主要组件,它关系到系统的成像质量。显微镜光路以无限远光学系统可方便地在其中插人光学选件而不影响成像质量和测量精度。物镜应选取大数值孔径平场复消色差物镜,有利于荧光的采集和成像的清晰。物镜组的转换,滤色片组的选取,载物台的移动调节,焦平面的记忆锁定都应由计算机自动控制。
        激光扫描共聚焦显微镜所用的荧光显微镜大体与常规荧光显微镜相同,但又有其特点:需与扫描器连接,使激光能进入显微镜物镜照射样品,并使样品发射的荧光到达检测器;需有光路转换装置,即汞灯与激光转换,同时汞灯光线强度可调。
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