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激光共焦显微镜设计特点
  • 发布日期:2015-12-02      浏览次数:1089
    •  激光共焦显微镜的设计特点:
      1.点照明
      2.具有照明pinhole和探测pinhole
      3.照明pinhole和探测pinhole共轭(共焦), 共焦点即被探测点,被探测点所在的平面为共焦平面
      4.具有扫描系统―― 逐点扫描成像
      5.具有多个(四个) 荧光通道,可同时探测多个被标记物
      例如: Leica TCS NT 的技术指标:
      1. xy分辨率比传统显微镜小1.4x
      传统显微镜: Rxy=0.61l/NA
      Confocal: Rxy=0.4l/NA
      2. 样品的zui大厚度:大约 2mm(10X/0.2物镜)
      取决于三点:
      物镜的景深, 与NA成反比
      Z轴的zui大移动范围
      激光的穿透力
      3. 样品的zui小光切厚度: 大约0.35 mm
      取决于两点: 物镜的数值孔径NA
      Z轴的zui小移动步距: 40nm
      Z轴的分辨率: 0.35 mm
      4. 激光器
      Kr/Ar激光器: 477nm, 488nm, 568nm, 647nm
      Ar激光器(UV): 361nm
      激光器的特点:
      1) 方向性好: 激光基本眼直线传播
      2) 单色性好 l=10-8nm
      3) 高亮度: 激光方向性好,其在空间上的能量分布是高度集中的
      4) 偏振性: 激光为平面偏振光, 光纤耦合
      5. 四个荧光通道, 一个透射光通道, 即除了可同时采集
      多标记荧光图像外还可以同时采集透射光图像,但透
      射光图像为非共焦图像
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